반응형 제한효소1 [생화학] 제한효소 전기영동 문제점 원인 및 해결방안 문제 원인 해결방안 DNA가 잘리지 않거나 부분적으로 잘리는 경우 DNA가 깨끗하지 않은 경우 DNA를 분광광도계와 아가로즈젤전기영동을 이용하여 정확한 농도와 순도를 확인해야 합니다. 순도가 낮으면 제한효소가 제대로 작용하지 못하게 됩니다. 따라서 Phenol/Chloroform 추출방법으로 단백질을 제거하고, 에탄올침전을 통해 불순물을 제거하거나 또는 DNA 분리kit 등을 이용하여 정제도를 높인 후 제한효소를 처리해야 합니다. DNA 농도가 너무 높거나 낮은 경우 DNA 농도가 지나치게 높으면 점도가 높아져 효소반응이 저해를 받게되므로 희석하여 반응하고 너무낮은경우는 반응효소의 Km 값이 낮아지기 때문에 부분절단현상이 나타나게되므로 DNA를 더 첨가하여 반응해야 합니다. DNA의 메틸화(dam, dc.. 2014. 11. 22. 이전 1 다음 반응형